文章來自博格隆 www.bestchrom.cn

博格隆的多模式層析填料兼具離子交換作用、疏水作用和氫鍵作用機制，表現(xiàn)出優(yōu)秀的分辨率，又因其獨特機制能夠耐受較高電導的樣品上樣，常用于酵母或動物細胞培養(yǎng)上清中的重組膠原蛋白純化，以及大腸桿菌破碎液中膠原蛋白的高效分離。本文聚焦博格隆多模式層析介質(zhì)在重組膠原蛋白純化中的應用。

膠原蛋白層析介質(zhì)選擇策略
 

Fig.1 膠原蛋白層析介質(zhì)選擇策略
 

多模式介質(zhì)MMC系列產(chǎn)品介紹

博格隆MMC系列產(chǎn)品包括Diamond MMC和Diamond MMC Mustang，下表列出了兩款填料的技術(shù)參數(shù)：

Table 1. Diamond MMC和Diamond MMC Mustang技術(shù)參數(shù)

對比兩款MMC產(chǎn)品參數(shù)，Diamond MMC粒徑大、離子載量高，適用于澄清料液中膠原蛋白的純化；Diamond MMC Mustang粒徑小，具有更高的分辨率，可用于需去除膠原蛋白降解片段的粗純或精純步驟。兩款填料均具備耐高鹽上樣的特點。
 

應用案例
  ? 案例1: Diamond MMC純化酵母表達III型膠原蛋白

樣品：電導35.16mS/cm，pH3.0

Fig.2 Diamond MMC層析純化圖譜

在此案例中，目標分子有較嚴重的降解，經(jīng)過優(yōu)化洗雜和洗脫電導和pH條件，最終去除降解片段和雜質(zhì)蛋白，獲得純度94.95%重組膠原蛋白組分。

? 案例2: Diamond MMC Mustang純化酵母表達XVII型膠原蛋白

樣品：用水稀釋2倍，調(diào)節(jié)電導為21.23mS/cm，pH4.0

Fig.3 Diamond MMC Mustang層析純化圖譜

在本案例中，上樣電導高達21.23mS/cm，無目標蛋白流穿；經(jīng)兩步洗雜效果明顯，最終通過鹽線性梯度洗脫，獲得高純度重組膠原蛋白。
 

總結(jié)

多模式層析介質(zhì)憑借其多種作用機制，具有耐高鹽上樣和高分辨等特點，適用于重組膠原蛋白的一步層析工藝設計，或兩步層析中的精純實現(xiàn)高純度膠原蛋白生產(chǎn)。隨著重組膠原蛋白產(chǎn)業(yè)發(fā)展，博格隆多模式層析介質(zhì)以其高效、靈活的特點，將在其中扮演重要角色