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超分辨率顯微鏡技術解析:以更多細節研究亞細胞結構與動態_abio生物試劑品牌網

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以空前的細節探索生命的真實本質    

超分辨率光學顯微鏡使您能夠以更多的細節研究亞細胞結構和動態。 使用 LIGHTNING 技術時,共聚焦圖像采集的空間分辨率提高了一倍,而使用 STED 時可以在納米尺度上提供洞察。了解更多關于徠卡顯微系統超分辨率方法的信息,以及它們如何在病毒學、免疫學、神經科學和癌癥研究領域推動新發現。
  什么是超分辨率顯微鏡? 超分辨率顯微鏡是一種光學成像技術,克服了光的衍射極限,允許以比傳統光學顯微鏡更多的細節可視化亞細胞結構和動態。使用 STED(受激發射損耗)和納米成像可以實現 30 納米的分辨率。納米級分辨率揭示了關于亞細胞結構和相互作用的更多細節信息。 

超分辨率顯微鏡在病毒學、免疫學、神經科學和癌癥研究領域推動了突破性的發現。
用于細胞生物學應用的多彩 TauSTED Xtend 775,要求對多個細胞組分進行納米級分辨率成像。細胞顯示出波形蛋白纖維(AF 594)、肌動蛋白網絡(ATTO 647N)和核孔籃(CF 680R)。樣本由布里吉特·貝爾格納、馬里亞諾·岡薩雷斯·皮斯菲爾、斯特芬·迪特策爾提供,生物醫學中心生物成像核心設施,路德維希-馬克西米利安大學,德國慕尼黑。
關于超分辨率
  由于光的衍射極限,“傳統”的熒光顯微鏡技術無法分辨低于 240 納米的結構。因為生物學并不止步于這個尺度,因此所謂的超分辨率顯微鏡技術是不可或缺的。 LIGHTNING 和 STED 是兩種引人注目的徠卡顯微系統超分辨率共聚焦方法,用于以更高的精度展示結構,并揭示無法看到的細節。 

LIGHTNING 檢測概念基于自適應去卷積,有效地將橫向分辨率提高到 120 納米。使用 LIGHTNING,您可以探測從微管動態到亞細胞區室結構的樣本。 

STED 納米顯微鏡將超分辨率提升到一個新的水平,使您能夠常規地實現低于 30 納米的橫向分辨率。通過 STED,您可以在體內剖析細胞結構和功能,例如染色質和核孔的重組、神經元結構的微小變化、線粒體和突觸囊泡的細胞內運輸、病毒顆粒的進入、蛋白質復合物的共定位等。
細菌鞭毛的圖像:相關的三色共聚焦-LIGHTNING-STED 成像允許同時使用互補的方法來研究和驗證樣本。樣本由德國柏林洪堡大學的 Marc Erhardt 提供。
  超分辨率顯微鏡是如何工作的? 超分辨率顯微鏡可以通過多種方式進行。 

● LIGHTNING 檢測概念使超分辨率共聚焦顯微鏡成為可能。與傳統的去卷積技術使用全圖像的全局參數集不同,它基于一種自適應去卷積過程,該過程使用體素特定的決策掩模來尋找合適的去卷積參數。 得益于強大的 GPU 計算,LIGHTNING 能夠在近實時的情況下同時處理多種顏色。結合共振掃描儀,它還提供了大視場和高幀率。   ● 受激發射損耗(STED)方法與共聚焦技術結合,可實現超分辨率熒光顯微術。STED支持多通道成像,并在三維空間內實現各向同性的超分辨率成像。其原理基于:使用激發熒光團的波長照射衍射極限光斑,同時以引發退激發或受激發射的波長照射環形區域。此設計使僅有亞衍射區域處于激發態,從而實現比傳統衍射極限光學顯微術更高的分辨率。 徠卡顯微系統的獨特TauSTED功能可在提升STED分辨率的同時,消除不必要的背景噪聲。


FluoCells 小鼠腸道切片。杯狀細胞的粘液,灰色,Alexa Fluor 350 WGA。細胞核,綠色,SYTOX Green。絲狀肌動蛋白,紅色,Alexa Fluor 568 phalloidin。
超分辨率顯微鏡與電子顯微鏡有什么區別?

超分辨率顯微鏡利用可見光光學來可視化樣本,而電子顯微鏡則利用電子束對樣本進行成像。這兩種技術各有優缺點,但只有超分辨率顯微鏡提供了對活體標本進行實驗標記多個分子靶標以賦予其特定對比度以及方便樣本準備的優勢。

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