2025 年 3 月 27 日，歐洲藥品管理局（European Medicines Agency, EMA）發布了《Guideline on the quality aspects of mRNA vaccines》，該指南適用于傳染病預防用 mRNA 疫苗，核心內容包括制造工藝控制、產品特性分析、質量標準制定、分析方法控制及原材料/活性成分/成品的定義等 5 個版塊。

隨著 EMA 新規的發布，mRNA 疫苗質控標準再度升級。指南特別強調了藥物開發過程中質量控制的重要性，并以明確定義的質量目標產品概況（quality target product profile, QTPP）為指導，并從中得出關鍵質量屬性（critical quality attributes, CQA）。以下是與藥物開發相關的屬性列表，明確每個屬性是否被認定為 CQA，是否被界定為典型的質量屬性，和/或是否被提及為需要表征的產品或工藝相關雜質：

值得注意的是，指南明確提出需要對 mRNA 疫苗的 LNP 粒徑、mRNA 包封率、游離 mRNA 含量及 LNP 空殼等關鍵參數進行表征。

• LNP 粒徑：影響 mRNA 疫苗的生物分布與遞送效率
• LNP 空殼：空載 LNP 被認為是雜質，可能降低疫苗效力
• mRNA 包封率：確保 mRNA 被有效包裹及有效遞送
• 游離 mRNA 殘留：可能引發非預期免疫反應，需控制

傳統的檢測方法（如電鏡、動態光散射）往往只能提供單一參數，且無法區分空載的 LNPs 與 mRNA LNP。NanoFCM（單分子納米生物檢測儀）基于其高靈敏特性，開發了 mRNA LNP 多維表征方案，恰好填補了這一領域的技術空白——僅需一臺設備，即可同步完成四大核心質量指標的精準檢測。

mRNA 疫苗質控的“全能選手”
NanoFCM 基于單顆粒水平檢測技術，可在1分鐘內完成以下關鍵分析：

1、粒徑與濃度檢測
無需標記，直接測量 LNP 的粒徑分布和顆粒濃度，確保滿足 EMA 要求的均一性標準。

2、空載 LNP
通過核酸染料標記，區分裝載 mRNA 的 LNP（紅色）與空載 LNP（藍色），通過這一數據結果，指導工藝優化，進一步降低空載 LNP 比例，提升疫苗的純度。

3、mRNA 拷貝數和包封率
基于 NanoFCM 對單個 mRNA 分子的高靈敏檢測，在單次檢測中同步識別游離 mRNA 和 mRNA LNP，通過儀器自身配套的專業分析軟件即可快速獲得單個 LNP 內包裹 mRNA 的拷貝數，進一步結合游離 mRNA 的定量分析即可獲得包封率。

4、多組分鑒定
基于 NanoFCM 散射和熒光雙觸發的特性，可快速實現成功裝載 mRNA 的 LNP（紅色）、未裝載 RNA 的 LNP 空殼（藍色）及游離的 mRNA（橙色）等組分的快速鑒定。

為什么 EMA 新規青睞這類創新技術？
1、符合國際監管趨勢
美國 FDA 早在 2021 年就呼吁采用高靈敏度檢測技術評估核酸藥物，而 EMA此次指南進一步明確了單分子、單顆粒水平分析的必要性。

基于NanoFCM卓越的散射和熒光靈敏度，可同時獲取 mRNA LNPs 的粒徑、濃度、空包率、載藥效率、mRNA 拷貝數等多項參數的表征結果，為 mRNA 疫苗的研發和質量控制提供了重要的技術保障。

2、提升工藝優化效率
國內 mRNA 疫苗先鋒石藥集團的研究團隊曾通過優化制備工藝，調整了 LNP 尺度和一些性質，顯著提升遞送效率及疫苗儲存穩定性，NanoFCM 可用于快速檢測空殼率從而反饋上游工藝改進效果。隨著石藥集團 mRNA 新冠疫苗的成功獲批（2022年）和創新制備方法論文（2023年）的發表，對于 mRNA 疫苗至關重要的表征參數如 LNP 尺寸、空載 LNP 等引起越來越多核酸藥物從業者的重視。（參見往期文章：重磅|石藥集團發布 mRNA-LNPs 的創新制備方法）。

3、穩健的檢測方法
對于制藥企業來說，不管是向下游的轉化還是面對監管的審查，藥物成品及中間產品的質量控制都至關重要，穩健的檢測方法重要性不言自明。

NanoFCM 憑借其良好性能展現了良好的數據準確性和重復性，贏得了科研及工業用戶的廣泛好評，且諸多已發表文獻也對此進行了充分的支撐，目前基于 NanoFCM 的技術對納米粒子的粒徑、濃度和生物性質表征已被納入多項團體標準和專家指南。

此外，NanoFCM 的系統會記錄并保存完整的原始數據，助力研究者回溯還原樣本的真實情況。在單分子的檢測范疇，信號極其微弱，原始數據的缺乏，難以滿足數據的重新分析和彌補錯誤解讀。

行業影響：mRNA 疫苗質控進入“精準時代”
隨著 EMA 新規的落地，NanoFCM 將成為 mRNA 疫苗企業的標配，隨著新冠疫情的結束，個性化 mRNA 療法（如癌癥疫苗）的興起，對載體系統乃至 mRNA LNP 成品的質控要求將更加清晰和嚴格。為了更好地匹配個性化 mRNA 療法的質控需求，目前 NanoFCM 已發布核酸藥物解決方案，除了以上檢測參數，增加了靶向配體的綜合表征方案，在細胞療法以及抗腫瘤藥物領域有廣泛的應用，歡迎垂詢！

福流生物自主研發的 NanoFCM，是唯一實現全球銷售的國產高端單分子納米生物檢測儀，憑借技術創新，被《Cell》、《Nature》等 CNS 頂刊高頻引用，超過半數的 TOP 20 的科研院所已經引進該設備；在工業領域，超過 70% 的全球 TOP 20 藥企正在使用 NanoFCM 推進脂質納米藥物、外泌體、病毒等領域的新藥研發和質量控制，NanoFCM 將成為推動核酸藥物從實驗室走向臨床的關鍵工具。