方案摘要：豬繁殖與呼吸綜合征，是由病毒（PRRSV）感染豬引起的一種高度傳染性疫病，臨床表現為母豬繁殖系統障礙，斷奶仔豬消瘦、生長遲緩以及死亡率增加。該病能引起豬體溫升高、呼吸困難，導致豬耳朵發紺，又稱藍耳病，PIpetty 電動移液器通過高精度分液、智能化控制及高效操作，全面優化了 IPMA 的關鍵環節，尤其在樣本處理、免疫反應及結果判讀中顯著提升實驗可靠性與效率。其技術優勢不僅滿足當前豬藍耳病毒檢測的標準化需求，更為未來自動化檢測平臺的搭建提供了核心工具支持。
 
方案詳情：
一、實驗原理
      豬藍耳病免疫過氧化物酶單層試驗（IPMA）是檢測豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS） 的經典血清學方法，核心用于檢測豬血清中的 PRRS 病毒特異性抗體，通過觀察細胞是否出現變色，可判斷血清中是否存在 PRRS 抗體。
二、? 實驗準備
1、設配和材料
① Pipetty電動移液器MSIC01-03-250、MSIC01-02-1000及配套吸頭；
② 倒置生物顯微鏡。
 
2、試劑和材料
① IPMA 診斷板；
② PRRSV 陽性血清、陰性血清和 HRP-兔抗豬IgG結合物；
③ 洗滌液；
④ 血清稀釋液和顯色/底物溶液。
 
三、實驗步驟
1、稀釋血清樣本：使用Pipetty電動移液器的連續分液功能，在空板的A排和E排各孔分別加入 180μL的血清稀釋液，其余各孔加120μL。將 20 μL被檢血清和對照血清分別加入 A 排和E排各孔（1：10 稀釋），搖動混勻；從 A排和 E排各孔內取 40 μL 分別加入 B排和F排孔，依次做1：40、1∶160、1∶640 稀釋。
 
2、設置連續分液模式，吸取上述板中稀釋血清樣本，按每孔/50μL，分別加入 IPMA 診斷板的相應孔內，封板后 37 ℃孵育1h，棄去液體，用 0.15 mol/mL NaC1（含 0.5%吐溫-80）洗板3次。
 
3、用 0.15 mol/L，NaC1（含0.5%吐溫-80）稀釋 HRP-兔抗豬 IgG 結合物為工作濃度，使用連續分液功能，按每孔50 μL，結合物稀釋液于板的孔中，封板后 37 ℃孵育1 h，洗滌3次。
4、在各孔中加入50μL顯色劑/底物溶液（AEC-H ₂0 ₂），在 18 ℃~22 ℃室溫下作用至少 30 min，棄去液體，加入 50 μL 0.05 mol/L 醋酸鈉溶液。
四、結果判定
1、試驗成立條件：將 IPMA 診斷板置于倒置生物顯微鏡下觀察。陽性血清對照孔細胞質呈現深紅色的特異性染色，陰性血清對照孔細胞質不被染色。
2、被檢血清樣本孔 30%~50%的細胞質呈現深紅色，判定為免疫過氧化物酶單層試驗陽性（IPMA+）：細胞質未被染色，判定為免疫過氧化物酶單層試驗陰性（IPMA一）。與陽性血清對照相比，若整孔細胞被染色，則視為血清樣本的非特異性反應。血清滴度以 50%以上的孔染色的最高稀釋度的倒數表示。血清樣本的滴度<10 判定為陰性；血清樣本的滴度為 10或 40判定為弱陽性，非特異性染色常在此范圍內：血清樣本的滴度≥160判定為陽性。