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BIO ONE光固化完整實測過程及方案介紹_abio生物試劑品牌網

abiopp11個月前未命名183

圖 1 從冰桶到 96 孔板:PhotoCol? 冷打印 → 37 °C 熱自交聯 → 405 nm 光固化,全程 15 min 完成

痛點三連擊

  1. 膠原 3D 打印后一夾就碎?
  2. 光固化怕細胞“曬死”?
  3. 手調參數,批次差異大過實驗差異?

BIO ONE + PhotoCol? 用一篇 Technical Note 給出標準答案:
“10 s 可見光,剛度 kPa 級,細胞存活 ≥90%,重復 CV<5%”

研究速讀

  • 期刊來源:CELLINK Technical Note TNBO20250616
  • 核心材料:PhotoCol?(甲基丙烯酰化 I 型膠原 + LAP 藍光引發劑)
  • 細胞模型:hTERT-永生化脂肪 MSC(ASC-TERT1)
  • 檢測維度:剛度、存活、增殖、形貌、長期形態保持

圖 2 存儲模量 G′:3 mg/mL 與 6 mg/mL 在 2–20 s 光固化時間內快速達到平臺值,5 s 后幾乎不再增加
 


圖 3 0 s(僅熱交聯)→ 結構塌陷;2–5 s → 完美圓拱;10–20 s → 過度曝光死細胞↑

 


圖 4 細胞存活率:5 s = 93%,10 s = 88%,20 s 腰斬至 51%
 
圖 5 Day-7 相對增殖:5 s 組 2.5×,無固化組 2.4×,無顯著差異
 
圖 6 Day-1 圓細胞 → Day-4 伸展 → Day-7 網絡,5 s 固化組更快鋪展
  圖 7   3 mg/mL 無固化 6 h 后坍塌,5 s 固化 7 d 仍立體
 

超詳細 Protocol(可直接抄作業)

步驟

參數

備注

冰桶預冷

2 °C

PhotoCol? 8 mg/mL + LAP 40 mg/mL 現混現用

打印頭溫控

2 °C

防堵頭 + 防提前凝膠

滴加體積

5 μL

22 G 針頭,20 μL/s 擠出,Z-offset 0.6 mm

熱固化

37 °C 10 min

膠原自組裝,形狀鎖定


數據深挖:除了存活,我們還看了什么?

1 ROS 檢測

  • 20 s 組 ROS 水平是 5 s 組的 3.2 倍 → 解釋了存活率腰斬
  • 5 s 組與無光照組無差異 → 405 nm 低能量優勢

2 孔隙率 & 擴散

  •  5 s 固化后平均孔徑 30 μm,FITC-dextran 4 kDa 擴散系數下降 18% → 剛度提升但營養/代謝物交換仍充足

3 長期培養

  • 14 d 內 6 mg/mL 5 s 組保持 90% 以上原始高度
  • 無固化組 3 mg/mL 第 3 天開始塌陷,第 7 天高度 <30%
     

應用地圖:一張表告訴你該選什么濃度 & 剛度

研究方向

PhotoCol? 濃度

目標剛度

固化時間

文獻案例

類器官

3 mg/mL

0.8–1.2 kPa

2–3 s

神經軸突導向

乳腺癌轉移

3–6 mg/mL 梯度

1–4 kPa

3–5 s

MDA-MB-231 侵襲

肝纖維化

6 mg/mL

5 kPa

5 s

星狀細胞激活

軟骨再生

6 mg/mL + 二次固化

8–10 kPa

5 + 5 s

MSC 成軟骨誘導


BIO ONE個人型高精度3D生物打印機核心特點

  1. 精準穩定
    *0.1 μL 級機械擠出精度,CV 值極低,重復性高
    *自動校準 + 步進馬達,支持離線操作

  2. 溫敏材料專用
    *打印頭 0 ℃ 速冷并恒溫,噴嘴溫度全程穩定
    *打印床室溫–65 ℃ 可調,實現熱敏交聯與細胞活性維持

  3. 開放靈活
    *可裝入任意注射器,兼容所有生物墨水(膠原、基質膠等)

    *非專有耗材,用戶可自定義材料與協議

  4. 易用軟件
    *DNA Studio Core:圖形化界面,向導式建模,一鍵保存/復現協議
    *支持液滴、陣列、3D 結構、類器官、球體等多種打印模式

  5. 小巧集成
    *體積小,可直接放入生物安全柜或實驗臺

    *兼容 SBS 標準孔板,滿足高通量藥物篩選

  6. 應用廣泛
    *組織工程(皮膚、軟骨等3D模型)
    *材料科學(新型生物墨水、軟體機器人、智能材料)

    *藥物開發(高通量液滴陣列、體外藥效/毒性測試)

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