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zenCELL owl活細(xì)胞成像系統(tǒng)助力神經(jīng)細(xì)胞-微纖維相互作用研究_abio生物試劑品牌網(wǎng)

abiopp12個月前未命名177
zenCELL owl助力神經(jīng)細(xì)胞-微纖維相互作用研究
——探索神經(jīng)元模型構(gòu)建新思路

生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域,構(gòu)建精確的 3D 細(xì)胞培養(yǎng)模型極具挑戰(zhàn),模擬如大腦、脊髓等超軟組織則更加困難。傳統(tǒng)的水凝膠符合這類組織的部分特性,但機(jī)械強(qiáng)度較弱,無法滿足實(shí)驗需求。已有研究使用Melt Electrowritten(MEW)支架進(jìn)行3D 構(gòu)建,卻依然存在結(jié)構(gòu)與水凝膠交織、實(shí)驗操作不便、限制神經(jīng)元調(diào)整纖維排列,以及無法同時進(jìn)行細(xì)胞和支架的生物打印等問題。為解決這些難題,將PCL 微纖維或納米纖維增強(qiáng)材料摻入生物墨水中,用于改善生物墨水的可打印性,提高水凝膠的機(jī)械完整性,還可以支持細(xì)胞黏附、分化和增殖。因此研究不同微纖維與神經(jīng)元細(xì)胞的相互作用,成為探索微纖維材料最適合神經(jīng)元模型的關(guān)鍵。

德國維爾茨堡大學(xué)醫(yī)院臨床神經(jīng)生物學(xué)研究所的科研團(tuán)隊對此問題進(jìn)行了深入研究,聚焦于不同微纖維的形態(tài)和力學(xué)特性,及其與神經(jīng)細(xì)胞之間的相互作用。通過精確控制微纖維的尺寸、形態(tài)、力學(xué)特性和表面化學(xué)性質(zhì),分析這些因素對神經(jīng)細(xì)胞行為的影響。相關(guān)研究成果以“Impact of Polymorphic Microfibers for Establishment of Neuronal Model”為題發(fā)表于《Nnao Select》雜志上。
 
  在本文中, innoME公司的zenCELL owl活細(xì)胞動態(tài)成像及分析系統(tǒng),實(shí)時監(jiān)測和記錄微纖維與NSC-34細(xì)胞的相互作用過程,并對圖片和視頻數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理,得到定性和定量結(jié)果。NSC-34細(xì)胞是一種具有運(yùn)動神經(jīng)元特性的細(xì)胞系,由富含運(yùn)動神經(jīng)元的胚胎小鼠脊髓細(xì)胞與小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤 N18TG2 融合而成,作為研究運(yùn)動神經(jīng)元生物學(xué)的重要模型,常被用于研究脊髓的神經(jīng)退行性疾病。該細(xì)胞包含兩種細(xì)胞群體:圓形、未成熟、幾乎沒有突起的細(xì)胞,以及經(jīng)歷分化、長突起的細(xì)胞,類似成熟的運(yùn)動神經(jīng)元細(xì)胞。將zenCELL owl 置于在37°C、5% CO?的培養(yǎng)箱內(nèi)對細(xì)胞進(jìn)行動態(tài)監(jiān)測,以每5分鐘一次的高頻次獲取圖像,并生成長時間的動態(tài)視頻,清晰展示了細(xì)胞與微纖維之間的動態(tài)互動過程。

研究發(fā)現(xiàn),不同微纖維引發(fā)的細(xì)胞行為差異明顯,而細(xì)胞對不同形狀、表面涂層和機(jī)械性能的微纖維反應(yīng)也不同。PCL Db + 微纖維會被細(xì)胞收集、攜帶或拖動,其細(xì)胞 - 微纖維組合的移動距離比未接觸細(xì)胞的微纖維長約 25 倍(圖1A);PCL Rd + 微纖維主要被細(xì)胞在邊緣接近,然后翻轉(zhuǎn)或轉(zhuǎn)動,接觸細(xì)胞的微纖維約每 10 幀就有一次旋轉(zhuǎn)運(yùn)動,而未接觸細(xì)胞的微纖維在超 500 幀中僅有三次較大方向變化(圖1B);Coll Rd 微纖維會使細(xì)胞聚集,隨著時間推移,細(xì)胞簇數(shù)量減少,但覆蓋總面積增加(圖1C)。

圖1 NSC - 34 細(xì)胞與不同類型微纖維之間的相互作用行為,第一行是通過BioRender.com創(chuàng)建的細(xì)胞行為示意圖,第二行是zenCell Owl的監(jiān)測圖片,第三行是分析的軌跡圖 Tracks 1 – 4(左下)和量化分析圖(右下)。其中, PCL Db+表示涂有膠原蛋白 I 的 PCL 啞鈴形微纖維,PCL Rd+表示涂有膠原蛋白 I 的 PCL 桿形微纖維,Coll Rd表示純膠原蛋白 I 桿形微纖維
研究團(tuán)隊還使用 Matrigel 水凝膠作為細(xì)胞外基質(zhì),對NSC-34 細(xì)胞與不同微纖維的相互作用進(jìn)行了3D培養(yǎng)驗證,并觀察到與2D培養(yǎng)中類似的 NSC-34 細(xì)胞行為(圖 2A–C)。

圖2 NSC-34 細(xì)胞在 Matrigel水凝膠中與不同微纖維相互作用的動態(tài)過程,細(xì)胞與纖維相互接觸,并進(jìn)一步形成細(xì)胞簇(紅色箭頭)
細(xì)胞與微纖維的相互作用受微纖維特性影響顯著,主要由微纖維的表面化學(xué)性質(zhì)、力學(xué)特性和形狀所決定,為開發(fā)更精確的三維神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)模型提供了重要的理論依據(jù)。通過選擇合適的微纖維特性,可以更好地模擬神經(jīng)細(xì)胞在體內(nèi)的生長環(huán)境,從而為神經(jīng)科學(xué)的研究和神經(jīng)退行性疾病的治療提供新的思路和方法。而zenCELL owl在這一研究中的成功應(yīng)用,也充分展示了其在細(xì)胞行為觀察和研究中的強(qiáng)大功能和潛力。

德國innoME公司研發(fā)的zenCELL owl活細(xì)胞動態(tài)成像及分析系統(tǒng),提供了一種創(chuàng)新的解決方案。該系統(tǒng)基于非標(biāo)記、非侵入的方法,能夠在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)長時間連續(xù)工作,通過24個顯微成像鏡頭對24個視野進(jìn)行連續(xù)的動態(tài)監(jiān)測和圖像獲取,為用戶提供高質(zhì)量圖像、視頻、統(tǒng)計學(xué)曲線和定量數(shù)據(jù)。

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文獻(xiàn)原文閱讀:
https://doi.org/10.1002/nano.202400122

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