AOPI熒光染色法：細(xì)胞活率分析的標(biāo)準(zhǔn)化解決方案_abio生物試劑品牌網(wǎng)
關(guān)于AOPI熒光染色法
AOPI熒光染色原理
AOPI試劑由AO（Acridine Orange，吖啶橙）和PI（Propidium iodide，碘化丙啶）組成。其中，AO是一種異染性熒光陽(yáng)離子染料，可滲透細(xì)胞膜，并嵌入所有細(xì)胞（活細(xì)胞和死細(xì)胞）的細(xì)胞核，檢測(cè)到綠色熒光。PI不能通過完整的細(xì)胞膜，只能進(jìn)入死細(xì)胞的細(xì)胞膜，并嵌入死細(xì)胞的細(xì)胞核，檢測(cè)到紅色熒光。當(dāng)AO、PI試劑均存在于細(xì)胞中，在合適的染料配比下，染料間會(huì)發(fā)生熒光共振能量轉(zhuǎn)移，致活細(xì)胞被激發(fā)出綠色熒光，死細(xì)胞被激發(fā)出紅色熒光。
使用CytScop系列智能細(xì)胞計(jì)數(shù)儀經(jīng)AOPI染色后獲得的代表性細(xì)胞圖像
傳統(tǒng)操作步驟
AOPI熒光染色法是一種可靠的分析細(xì)胞活率的方法，
但減少主觀因素影響，實(shí)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作才能獲得可靠性和一致性的結(jié)果
。
AOPI熒光染色法標(biāo)準(zhǔn)化的基石：微流控+AI模型
CytScop?Pro智能細(xì)胞計(jì)數(shù)儀通過微流控芯片全自動(dòng)染色混勻、AI算法自動(dòng)識(shí)別分析樣品，無(wú)需手動(dòng)移液、染色、混勻、上樣、細(xì)胞活率分析等操作，實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)標(biāo)準(zhǔn)化細(xì)胞樣品活率分析，消除主觀因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。檢測(cè)完成一個(gè)樣品后，自動(dòng)清洗，確保樣品之間的檢測(cè)一致性，提高結(jié)果的可靠性和重復(fù)性。
微流控芯片
自動(dòng)染色&混勻：AOPI染料集成于芯片流道，細(xì)胞懸液注入后自動(dòng)溶解混合，消除人工配液誤差；專利的微米級(jí)通道設(shè)計(jì)使得樣品混勻過程保持樣品的完整性；使得儀器液路系統(tǒng)更加精簡(jiǎn)， 用戶在日常操作中所需給設(shè)備清潔和維護(hù)工作量大幅降低。
雙熒光+明場(chǎng)大視野光學(xué)系統(tǒng)成像
CytScop的光學(xué)專利技術(shù)利用細(xì)胞與其周圍水介質(zhì)之間的微小折射率差異來(lái)增強(qiáng)細(xì)胞與其類似的透明溶液中產(chǎn)生高效的對(duì)比度。這種技術(shù)方法在明場(chǎng)模式下，能夠突出細(xì)胞的外觀形態(tài)和局部特征均能產(chǎn)生明顯的差異，具有非常好的立體感和極佳的細(xì)節(jié)表現(xiàn)能力。系統(tǒng)在暗場(chǎng)熒光下，系統(tǒng)能夠收集更多的熒光信號(hào)，從而增強(qiáng)不同波長(zhǎng)的熒光特異性。
AI算法
CytScop?的AI模型能夠更科學(xué)地識(shí)別細(xì)胞凋亡/團(tuán)簇團(tuán)聚等復(fù)雜情況；模型運(yùn)行時(shí)，不再需要人為設(shè)置各種參數(shù)閾值如直徑、亮度、圓度、系數(shù)等，對(duì)不同的細(xì)胞類型/生物工藝具有良好的可拓展性與更準(zhǔn)確的泛化能力，使得分析結(jié)果更加準(zhǔn)確。
綜上所述，基于AOPI熒光染色法并結(jié)合CytScop?細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的自動(dòng)化分析，為細(xì)胞治療產(chǎn)品的細(xì)胞活率分析提供了一個(gè)高精度、標(biāo)準(zhǔn)化的解決方案。通過完全自動(dòng)化操作生成的客觀、可量化、可追溯數(shù)據(jù)，為GMP合規(guī)性提供了堅(jiān)實(shí)保障；其強(qiáng)大的細(xì)胞類型兼容性，使其能有效適應(yīng)不同來(lái)源、形態(tài)各異的復(fù)雜細(xì)胞樣本，覆蓋從中間過程控制及工藝評(píng)估等關(guān)鍵工藝步驟；同時(shí)，微流控技術(shù)的創(chuàng)新應(yīng)用顯著降低的樣本消耗量，使其對(duì)自體細(xì)胞等珍貴的治療性細(xì)胞樣本尤為友好，為細(xì)胞產(chǎn)品研發(fā)和生產(chǎn)提供更加準(zhǔn)確、高效、便捷的細(xì)胞計(jì)數(shù)和分析解決方案。
