客戶論文發表 | 非定點方法構建的靶向CLDN18.2探針68GaNOTA-376的體內外性質評價

文獻信息
北京大學腫瘤醫院暨北京市腫瘤防治研究所，核醫學科，國家藥監局放射性藥物研究與評價重點實驗室，惡性腫瘤發病機制及轉化研究教育部重點實驗室等團隊的研究成果“非定點方法構建的靶向CLDN18.2探針⁶⁸GaNOTA-376的體內外性質評價”在學術期刊《腫瘤影像學》上發表。平生公司的小動物PET/CT（型號：Super Nova）產品在論文中提供了重要的腫瘤小鼠PET/CT圖像和定量分析。

該研究的通訊作者為北腫楊志主任，朱華研究員。第一作者為劉暢。

文獻背景
[摘要]目的：以非定點標記的方法構建⁶⁸Ga標記的靶向CLDN18.2的正電子發射體層成像（positron emission tomography，PET）探針⁶⁸Ga-NOTA-376，并評價其體內外性質。方法：以p-SCN-Bn-NOTA為螯合劑，非定點偶聯靶向CLDN18.2的納米抗體376，得到前體NOTA-376，對偶聯后的前體進行⁶⁸Ga放射性標記。通過放射性薄層色譜法（Radio thin layer chromatography，RAIo-TLC）測定探針的標記率、放射化學純度及體外穩定性，并進行探針在人胃腺癌小鼠模型的micro-PET/計算機體層成像（computed tomography，CT）顯像實驗。結果：⁶⁸Ga-NOTA-376顯示出高標記率（89.98±0.07）%、高放射化學純度（97.67±0.02）%以及較高的比活度（16.69±6.60）GBq/μmol，并且在5%人血清白蛋白（human serum albumin，HSA）和磷酸鹽緩沖溶液（phosphate buffered saline，PBS）中保持穩定。Micro-PET/CT結果表明探針在CLDN18.2陽性腫瘤中的最大標準攝取值（maximum standard uptake value，SUVmax）顯著高于CLDN18.2陰性腫瘤，4.0 h時CLDN18.2陽性腫瘤及CLDN18.2陰性腫瘤的SUVmax分別為9.08±0.33及1.92±0.32。結論：本研究以非定點標記的方法成功構建了靶向CLDN18.2探針⁶⁸Ga-NOTA-376，標記率高，具有良好的穩定性及靶向性，是一種有潛力的PET探針，可用于CLDN18.2蛋白表達水平的檢測。

實驗方法
⁶⁸Ga-NOTA-376的Micro-PET/CT顯像
AGS CLDN18.2 /AGS模型裸鼠尾靜脈注射5.55 MBq ⁶⁸Ga-NOTA-376，在注射后0.5、1.0、2.0、4.0 h，使用異氟烷氣體麻醉荷瘤小鼠，進行靜態PET掃描。經過平生醫療科技有限公司的Avatar3重建后獲得Micro-PET/CT融合圖像，勾畫各個器官的感興趣區（region of interest，ROI）計算最大標準攝取值（maximum standard uptake value，SUVmax）。

實驗結果
模型鼠Micro-PET/CT顯像
對右側腋窩處攜帶AGS/AGS^CLDN18.2腫瘤的BABLC/c裸鼠注射⁶⁸Ga-NOTA-376后的0.5、1.0、2.0、4.0 h進行Micro-PET/CT顯像。

圖像顯示腎臟在⁶⁸Ga-NOTA-376注射后的各個時間點具有很強的放射性，0.5、1.0、2.0、4.0 h各個時間點AGS模型鼠腎臟的SUVmax分別為12.69±0.29、12.33±0.07、47.22±0.99、49.48 ± 0.16，AGS^CLDN18.2模型鼠腎臟的SUV max分別為12.92±0.77、14.10±0.05、54.44±0.33、55.51±0.33（圖4），表明⁶⁸GaNOTA-376經過泌尿系統代謝。⁶⁸Ga-NOTA-376在AGS^CLDN18.2腫瘤部位快速積聚，0.5 h已可見腫瘤顯像，SUVmax為2.02±0.19，2.0 h可觀察到腫瘤高對比度成像，SUVmax為8.63±0.09，并隨時間延長攝取逐漸升高，4.0 h時SUVmax為9.08±0.33（圖4）。

在注射 ⁶⁸Ga-NOTA-376 后的各個時間 點 AGS^CLDN18.2模型鼠腫瘤（ T ）與肌肉 （ M ） 的 SUV max之比均顯著高于 AGS模型鼠（ P ＜ 0.05 ， 圖 5 ），并在注射后2.0 h達到最大值55.70±6.81。

文獻結論
CLDN18.2高表達的AGS細胞系及野生型的AGS細胞系小鼠移植瘤模型Micro-PET/CT結果顯示，⁶⁸Ga-NOTA-376在小鼠細胞及腫瘤中的攝取與CLDN18.2的表達高度相關，AGS^CLDN18.2模型鼠的攝取值明顯高于AGS模型鼠的攝取值。本課題組此前研究中的免疫組織化學的結果顯示，AGS^CLDN18.2腫瘤中CLDN18.2高且均勻表達，而AGS腫瘤中CLDN18.2表達呈陰性。

綜上所述，本文建立了標記率高、放射化學純度高、穩定性可靠且靶向性好的CLDN18.2靶向的納米抗體放射性探針的⁶⁸Ga非定點標記方法，顯示出進一步應用于臨床進行靶向治療患者篩選及治療效果評估的潛力。

使用設備

                                                 Super Nova^? Micro PET/CT（III 代外觀圖）